El sorteo del fixture de la Temporada 2024 de la Primera Nacional determinó que Defensores Unidos juegue en la primera fecha como visitante frente al Sabalero, recientemente descendido de la Liga Profesional.
El certamen quedó dividido en dos grupos de 19 equipos (son 38 en total) y el Celeste integrará la Zona B. Así, después de visitar a Colón en la fecha inaugural, recibirá a Estudiantes de Río Cuarto en lo que será su primera presentación como local del año.
Posteriormente, el fixture le deparó la siguiente seguidilla de enfrentamientos: Aldosivi (V), Mitre (L), Gimnasia y Tiro de Salta (V), Gimnasia de Mendoza (L), Nueva Chicago (V), Deportivo Morón (L), Temperley (V), Brown de Adrogué (L), Almagro (V), Defensores de Belgrano (L), Chaco For Ever (V), San Telmo (L), Atlético de Rafaela (V), Deportivo Madryn (L), Agropecuario (V), Atlanta (V) y Almirante Brown (L).
